破骨細胞【Osteoclast】 | ラット・マウス骨髄、ヒト単核球から分離した破骨細胞

Sapporo division of Cosmo Bio Co Ltd.　コスモ・バイオ株式会社札幌事業部

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		破骨細胞【Osteoclast】

破骨細胞（ラット）

骨組織は、骨吸収と骨形成が絶えず代謝し骨のリモデリング（再構築）をおこなっています。この骨吸収に担っている細胞は破骨細胞のみで、骨吸収能が活性化し、相対的に骨形成能が低下した場合、骨量が減少し骨粗しょう症になることが知られています。

本製品は、M-CSFとRANKLの存在下で骨髄細胞から破骨細胞へと分化誘導します。また播種時に象牙質切片もしくはオステオアッセイプレート上などで培養することで、骨吸収窩が形成し骨吸収能を評価することができます。

骨代謝研究およびピットフォーメーションアッセイ（Pit Formation Assay）等にご利用ください。

		ヒト破骨細胞のピットフォーメーションアッセイ

測定装置：　走査型電気化学顕微鏡

ヒト破骨前駆細胞を象牙質切片上で培養後（2週間）、切片を回収し、5 mLの1 Mアンモニア水中で超音波処理し
細胞を剥離しました。処理した切片をアンモニア水から取り出し、マイヤーのヘマトキシリン液で1分間染色し、
水洗、乾燥させた後、破骨細胞によって形成された吸収窩を観察し、形状の測定を行いました。
※本測定には、特殊専用加工を行った象牙質切片を使用しております。詳細についてはお問い合わせください。

測定例１）
形成された骨吸収窩を広い範囲で形状測定を行いました。

図１）ヘマトキシリン染色

図２）測定結果

さらに、図２□内の骨吸収窩の詳細を調べるため、高解像度で測定を行い、深さを解析しました。

図３）骨吸収窩の深さ解析結果

測定例２）
同様に、形成された骨吸収窩形状を測定後、単一の骨吸収窩形状データを抽出して体積を計算しました。

図４）骨吸収窩の体積測定結果

		凍結細胞

凍結細胞は細胞と培地が単品販売となりました。細胞は専用培地とセットでご使用ください。

品番	品名	動物	週齢	組織	容量	価格	専用培地
新発売 OSC12C	ラット破骨細胞	SDラット	成熟動物	骨髄細胞	2x10⁶cells　2本	¥53,000	OSCMW（洗浄用） OSCMR（培養用）
新発売 OSC14C	マウス破骨細胞	ICRマウス	成熟動物	骨髄細胞	2x10⁶cells　1本	¥95,000	OSCMW（洗浄用） OSCMM（培養用）
新発売 OSC15C	ヒト破骨細胞	ヒト	-	単核球	1.5x10⁶cells　1本	¥125,000	OSCMW（洗浄用） OSCMHB（培養用）

■OSC12Cのマニュアルはこちら	■OSC14Cのマニュアルはこちら
■OSC15Cのマニュアルはこちら

		オステオアッセイプレート付破骨細胞培養キットは2018.10.31販売終了いたしました

品番

品名

動物

週齢

組織

容量

価格

OSC31

破骨細胞培養キット
V-4

SD
ラット

成熟動物

骨髄細胞

破骨前駆細胞（ラット・凍結） 2×10⁶ cells	4本
洗浄用メディウム　　100 mL	1本
培養用メディウム　　50 mL	1本
オステオアッセイプレート	1枚

販売終了

OSC32

破骨細胞培養キット
V-2

破骨前駆細胞（ラット・凍結） 2×10⁶ cells	2本
洗浄用メディウム　　50 mL	1本
培養用メディウム　　25 mL	1本
オステオアッセイプレート	1枚

販売終了

OSC33

ICR
マウス

破骨前駆細胞（マウス・凍結） 2×10⁶cells	2本
洗浄用メディウム　　50 mL	1本
培養用メディウム　　25 mL	1本
オステオアッセイプレート	1枚

販売終了

OSC34

破骨細胞培養キット
V-1

破骨前駆細胞（マウス・凍結） 2×10⁶ cells	1本
洗浄用メディウム　　50 mL	1本
培養用メディウム　　25 mL	1本
オステオアッセイプレート	1枚

販売終了

OSC35B

ヒト

単核球

破骨前駆細胞（ヒト・凍結） 1.5×10⁶ cells	1本
洗浄用メディウム　　50 mL	1本
培養用メディウム　　30 mL	1本
オステオアッセイプレート	1枚

販売終了

■OSC31マニュアルはこちら	■OSC32マニュアルはこちら
■OSC33マニュアルはこちら	■OSC34マニュアルはこちら
■OSC35Bマニュアルはこちら

●	2018.10.31をもちましてオステオアッセイプレート付き破骨細胞培養キットは販売終了いたしました。本培養キットに使用されている凍結細胞および各種専用培地は、引き続き単品で購入可能です。またオステオアッセイプレートはコーニング社で（品番#3989）販売しております。

製品特性/用途

調製方法

破骨細胞形成実験、Pit Formation Assayなどに利用可能。

骨髄細胞から接着性の違いにより破骨前駆細胞を純化

各種因子

品番	品名	容量	価格
AK30	RANKL	10μg	¥ 18,000

●培養用メディウム（ラット）に含まれるRANKLと同一になります。
●RANKL濃度を変更する実験に便利です。

■AK30の添付文書はこちら

		専用培地

品番	品名	容量	価格
OSCMW	破骨細胞　洗浄用メディウム	100 mL	¥ 11,500
OSCMR	破骨細胞　培養用メディウム(ラット用）	50 mL	¥ 31,500
OSCMM	破骨細胞　培養用メディウム(マウス用）	50 mL	¥ 31,500
新発売 OSCMHB	破骨細胞　培養用メディウム(ヒト用）	30 mL	¥ 30,000

●	破骨細胞培養専用にロットチェック済み血清を含む培地
●	本製品は、骨髄細胞から破骨細胞へと分化できるようにRANKL(receptor activator of NF-κB ligand)と M-CSF(macrophage-colony stimulating factor)を含む含む培地です。

ヒト由来初代培養細胞（海外メーカー別）は、こちらをご覧ください

FAQ（よくある質問と答え）

Q.	継代は可能ですか？
A.	破骨細胞はトリプシン処理で培養容器から離脱することは難しく、成熟破骨細胞の継代はセルスクレーパーを用いて物理的に剥がす方法と、あらかじめコラーゲンゲル上で培養する方法が知られています（動物細胞工学ハンドブック・日本動物細胞工学会編集、44ページ、朝倉書店）。ただどちらの方法も一般に回収率がよくありませんでしたのでご注意ください。
Q.	Pit Formation Assayにおいて、Pitの観察方法は？
A.	ヘマトキシリンで染色後、実体顕微鏡で観測してください。
Q.	培地を再凍結して使用することはできますか？
A.	培地を数回に分けてご使用されたい場合、キットに含まれる培養用メディウムをいったん融解し、10ml/tube程度に分注、-20℃以下に凍結保存してください。繰り返しの凍結融解はM-CSF、RANKLの失活の原因となるため避けて、融解させた培地は都度、使い切りとしてください。