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ヒト 母乳由来エクソソーム/ミルクエクソソーム【Breast Milk/Milk Exosome】・シリーズ
<ヒト 母乳由来エクソソーム>

Exosome (エクソソーム) は、ほとんどの細胞で分泌される直径 50 nm 〜 150 nm 程度の膜小胞で、生体内では唾液、血液、尿、羊水、悪性腹水等の体液中で観察され、また培養細胞から分泌されていることも確認されています。このエクソソームは、miRNA やmRNA、タンパク質、マイクロペプチドなどを内包し、由来する細胞や組織から離れた別の標的細胞や組織へと情報を伝達する役割を担うことが示唆されている1ものの、その標的指向性はまだ完全には明らかになっていません。

一方で、エクソソームによる情報伝達をCD9、CD63 といったエクソソーム表面抗原特異的な抗体で中和することにより、がん転移を抑制できることがわかっています。2ヒト母乳中にもエクソソームが存在し、CD63 やCD81 といったエクソソームマーカーを発現することがわかっています。3 ヒト母乳中のエクソソームは多くのmiRNA を内包しますが、なかでも免疫に関するmiRNA が多く同定されており、これらのmiRNA が母から乳児に移動する可能性が示唆されています。4 ヒト母乳中エクソソームによる免疫細胞の制御についていくつかの報告がある3,5 一方で、ブタの乳由来のエクソソームでは、乳仔の腸管上皮細胞に対して直接増殖促進の機能を示すという報告もあり6、母乳中のエクソソームの機能やその作用メカニズムに関する研究が注目されています。

本商品は、健康なヒトから倫理的に適切な手続きを経て提供された母乳から、超遠心分離法によって調整したエクソソーム画分です。in vitro から in vivo まで幅広い実験にご利用いただけます。原料母乳はFDA の認める方法によって感染症に非感染であることが確認されています。

ムチンの構造
図.1 CD9,63,81 モノクローナル抗体を用いたWestern Blotting
タンパク質量として0.5μg を用いて、Anti-CD9 モノクローナル抗体(品番:SHI-EXO-M01)、Anti-CD63 モノクローナル抗体(品番:SHI-EXO-M02) およびAnti-CD81 モノクローナル抗体(品番:SHI-EXO-M03) で検出した。
眼表面に発現しているムチンの種類
図.2 NanoSight を用いた粒度分布測定
本品をPBS で200 倍希釈し、NanoSight LM10 で測定した。
平均粒度:179nm
本品1mL 当たりの粒子数: 2.3 × 1012 Particles
* エクソソーム粒子数はロットごとに異なります。商品に添付のCoA をご参照ください。
コード 品名 容量 価格
EXHM100L Breast Milk Exosome, Human
100uL 10 vial
¥60,000
マニュアルはこちら

参考文献

  1. Tumour exosome integrins determine organotropic metastasis, Hoshino A, et al., Nature. 2015 Nov 19; 527(7578): 329-35.
  2. Disruption of Circulating Extracellular Vesicles as a Novel Therapeutic Strategy against Cancer Metastasis, Nao Nishida-Aoki, et al., Mol Ther. 2017 Jan 4; 25(1): 181-191.
  3. Exosomes with Immune Modulatory Features Are Present in Human Breast Milk, Charlotte A, et al., J Immunol August 1, 2007, 179 (3) 1969-1978.
  4. microRNA as a new immune-regulatory agent in breast milk, N Kosaka, et al., Silence. 2010 Mar 1;1(1):7
  5. Exosomes from breast milk inhibit HIV-1 infection of dendritic cells and subsequent viral transfer to CD4+ Tcells, Naslund TI et al., AIDS. 2014 Jan 14;28(2):171-80.
  6. Porcine milk-derived exosomes promote proliferation of intestinal epithelial cells, T Chen, et al., Scienti_ c Reports volume 6, Article number: 33862 (2016)
 
<ミルクエクソソーム>

国産生乳由来の Exosome(エクソソーム)です。健康な牛から採取された生乳から超遠心分離法によりエクソソーム画分を調製しています。in vitro から in vivo まで幅広い実験にご利用いただけます。 本商品は、以下の国立がん研究センター研究所 分子細胞治療分野 吉岡祐亮先生の研究プロジェクトによる成果を応用して開発致しました。

日本医療研究開発機構(AMED)
革新的バイオ医薬品創出基盤技術開発事業
課題名:エクソソーム改変技術を用いた 新規ドラッグデリバリーシステムの開発
研究代表者:吉岡祐亮 先生

ムチンの構造
図1  CD81 モノクローナル抗体を用いた Western Blotting
眼表面に発現しているムチンの種類
図2  NanoSight を用いた粒度分布測定
コード 品名 容量 価格
EXBM100L Milk exosome, Bovine
100uL 10 vial
¥30,000
EXBM1000L Milk exosome, Bovine
1mL 10 vial
¥100,000
マニュアルはこちら
 
<ミルクエクソソームELISAキット>
抗ミルクエクソソーム抗体をキャプチャー抗体とし、エクソソーム・マーカーのひとつである抗CD81 モノクローナル抗体を検出用抗体としたサンドイッチELISA キットです。健康な牛から採取された生乳から超遠心分離法により調製したエクソソーム画分を標準エクソソームとして、ウシミルクやウシ血清といった検体中のエクソソームを定量することができます。
特長
  • ウシミルク、ウシ血清などに含まれるエクソソームを直接定量可能
  • 特殊な装置は不要、通常のプレートリーダーで測定可能( 波長: 450nm)
  • 超遠心精製法により分画したウシ由来ミルクエクソソームを標準品として添付
構成内容
  • 固相化抗体 (×100)
  • 固相化抗体希釈液
  • 96 well プレート
  • プレートシール
  • アッセイバッファー
  • 洗浄液(×10)
  • ミルクエクソソーム原液 (450μg/mL)
  • ビオチン化・抗CD81 抗体 (×100)
  • HRP 標識アビジン (×100)
  • 発色基質溶液
  • 反応停止液

製品データ


図1. 標準曲線の例
2 次曲線回帰(左記グラフ)で近似曲線を作成する。


図2. ウシミルク中のエクソソームの測定例
ウシミルク間でエクソソーム含量に違いあることが分かった。


図3. ウシ血清中のエクソソームの測定例
エクソソーム濃度は成牛血清濃度が高く、超遠心でエクソソームを除去すると低くなった。これに比べ牛胎児血清はエクソ ソーム含量が低いことが分かった。

コード 品名 容量 価格
EXBMEL
Milk Exosome ELISA Kit, Bovine
1 KIT 96test
¥85,000
マニュアルはこちら
 
<ウシミルクエクソソーム抗体>
ウシ由来のエクソソーム研究に有用、お手頃価格のポリクローナル抗体。
抗原:ウシミルクエクソソーム
免疫:Rabbit
精製:Ammonium sulfate precipitaion
Buffer: PBS(-), 15ppm procline300
コード 品名 容量 価格
EXO-AB-01
Anti Bovine Milk Exosome
100uL (1mg/mL)
¥30,000
マニュアルはこちら
 
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参考文献
  1. Tumour exosome integrins determine organotropic metastasis, Hoshino A, et al., Nature. 2015 Nov 19;527(7578):329-35.
  2. Disruption of Circulating Extracellular Vesicles as a Novel Therapeutic Strategy against Cancer Metastasis, Nao Nishida-Aoki, et al., Mol Ther. 2017 Jan 4;25(1):181-191.
  3. Bovine milk exosomes contain microRNA and mRNA and are taken up by human macrophages, Hirohisa Izumi, et al., J Dairy Sci. 2015 May;98(5):2920-33
  4. Milk-derived exosomes for oral delivery of paclitaxel, Ashish K.Agrawal et al., Nanomedicine. 2017 Jul;13(5):1627-1636.
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